- 瑞士,欧洲乃至全球包括美国在Corona病毒核酸PCR检查的阳性诊断标准上,可能存在“系统性偏差”。而这个偏差,导致被诊断为新冠病毒阳性人数最多能比实际“真正有意义”阳性的甚至可能多到50-70%以上。导致川普总统大选时吃了大亏。
- 新冠病毒阳性诊断的“系统性误差”与核酸RT-PCR检查的Ct值的标准列得过高或者“只依赖高标准的Ct值做阳性判断依据“有关。
- 台湾0感染期间,也就是在台湾“全民阴性”期间,从台湾返国的人,在自己国家被诊断为阳性。可这些人确实无症状,无传染性。
- 新冠病毒核酸检测常识 1 --什么是核酸RT-PCR检测?核酸PCR检测新冠病毒的原理?
- 什么是PCR?
- 什么是RT-PCR?
- 新冠病毒核酸检测常识 2 -- 什么是RT-PCR的Ct值?
- 新冠核酸PCR的Ct值结果究竟应该是多少被诊断为阳性?当前的37-40太高,可能应该为30或以下
- 德国RKI 认为,CT值超过30时,不代表是“阴性”,“但病毒量少,以至于无繁殖能力”
- 美国哈弗大学流行病学家认为,CT值设置为37-40时,不仅能检测到活病毒,还能检测到病毒碎片
- CT值设置为37-40时,其它冠状病毒PCR测试也可能阳性
- 中国核酸PCR检查CT值阳性判断国家指导标准也是37-40
- 中国新型冠状病毒肺炎防控方案(第七版)
- 中国某厂新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸检测试剂盒(PCR荧光探针法)说明书里的阳性判断标准
- 参考文献:
- 补充修改
瑞士,欧洲乃至全球包括美国在Corona病毒核酸PCR检查的阳性诊断标准上,可能存在“系统性偏差”。而这个偏差,导致被诊断为新冠病毒阳性人数最多能比实际“真正有意义”阳性的甚至可能多到50-70%以上。导致川普总统大选时吃了大亏。
作为本科医学专业,父亲和许多亲友居住在武汉,很多校友在武汉和美欧医院工作,自己现在瑞士旅游和酒店行业一线的人,有很多理由对疫情一直保持相当的关注。
对瑞士为什么现在突然就日增1万左右Covid病毒阳性,气势汹汹地进入了“第二波疫情”期很有些不解。我观察到他们每天报告的阳性和他们死亡,入院,重症等各种数据以及我对身边实际情况的了解非常不符合。又分析了一下欧洲的数据,也觉得有问题。开始寻找可能的原因和解释。
然后,发现了一个非常不可思议的事实:瑞士,欧洲乃至全球包括美国,中国,在Corona病毒核酸荧光定量PCR检查的阳性诊断标准上,可能存在“系统性偏差”。 而这个偏差,可能导致有机被诊断为新冠病毒阳性人数的最多能比实际“真正有意义”阳性的最多要最高到70%以上。
这种诊断标准的设置偏差,导致实际意义的真正的的阳性感染人数数据巨大”失真“。从而导致各国政府采取各种不必要措施,造成民众巨大恐惧,除了造成不必要的损失,包括一些不必要的医疗资源占用,增加了不必要的死亡,严重影响民众生活质量。
我想起之前一直让我觉得不可思议的美国的阳性感染人数和正在举行的美国总统大选。虽然一直惊讶美国的感染人数数据,但瑞士春季疫情和恢复期的数据都是我觉得可以接受的。所以,从来没怀疑过,这个全球作为诊断依据的测试会有什么问题。
这次因为对瑞士十月以来的“第二波疫情”数据觉得不可理解,产生极大怀疑,仔细追踪分析,才发现可能是诊断测试标准出的问题。而且,这个问题不止瑞士有,所有被称“进入第二波疫情”的欧洲国家都有。
那么美国呢?我想起海外华人医生群里,有几个在美国医院做临床医生的校友最近都表示过,他们在自己所在医院对当地新冠死亡和重症数字的感受,和美国媒体对阳性病例的报告的天量数字不完全符合。
我就向群里在美国的一个师兄咨询。他在洛杉矶有自己的病理实验室。他们实验室是有新冠病毒检测资格的,能给回中国的客人做核酸和IgM检测,当天出报告(大伙有需要的,可以找他们测试。距离机场20英里)。有CAP/CLIA/NYSDH认证。也是加州卫生部指定实习基地。我问了下他们实验室核酸PCR的Ct阳性值标准,他说,不同试剂盒不同,他们现在Teqpath是37.
也是37!果然!美国的标准也可能有问题。
那川普可真是很有些冤枉了!疫情控制不力,感染人数巨多是这次美国总统大选中川普最被人诟病的地方之一。他们邮寄选票也因此增多,对他的当选造成极大影响。但,这巨大的阳性人数,如果是因为,阳性标准值判断值的设定问题,导致其中50-70%甚至90%的“假阳性”呢?
新冠病毒阳性诊断的“系统性误差”与核酸RT-PCR检查的Ct值的标准列得过高或者“只依赖高标准的Ct值做阳性判断依据“有关。
现在基本全球所有国家对新冠病毒的实验室检查,主要检测方式之一都是核酸RT-PCR检测。一般将核酸检测阳性作为新型冠状病毒感染的标准。包括中国现在入境要求的双阴检查,其中有一个就是核酸检查阴性。
普通人包括绝大多数临床医生,都只知道新冠病毒阳性就是核酸PCR检查结果阳性。很多人以为,这个结果,是一个简单的定性问题,不是阴就是阳,类似早孕试纸一样。极少人知道,目前,全球做病毒核酸PCR检测,基本是根据一个“Ct”值的数字判断是否阳性。
这个不是大家熟悉的放射科拍的CT片的“CT”(Computertomographie),而是另外一个专有名词:“Cycle Threshold”,扩增循环数。它在一定数值以下,被判断为新冠病毒阳性;一定数值以上,就被判定为“阴性”。这个数字的标准判读,目前可能存在很大问题 。
我前两天发现这个问题后,曾经问过在德国做临床医生的同学,她也是知道PCR测试的大致原理,但完全没听说过核酸PCR检测的Ct值。她说,她女儿从德国回伦敦前48小时内化验单上,只写着PCR nicht nachgeweisen (PCR检测阴性),上面是不标Ct值的。事实上,全球目前发给医生和冠状病毒患者的结果中大概都没包含发现病毒所需的Ct值。
某个角度上来说,“术业有专攻”。病毒检测学结果的判读属于病毒检测部门的事,临床医生一般情况下,只要知道是不是“阳性”,再根据临床症状去进行下一步。
但这也就无意中导致了临床和检测的某种意义的脱节。临床医生看到的都是各种个例的情况,遇到检测结果和临床“不符合”的,只能从临床个例去解释,不能也不敢在更基础的层面去“质疑”,可能是检测的标准有问题。检测报告的阳性,可能不是真正的阳性。而且,很可能还是全球性问题。
目前,绝大多数国家,这个CT值,设置为37,38,有些甚至设置为40以下为阳性。而实际上,这个阳性标准值,可能应该为35或甚至30以下。
“不同CT值作为阳性判断标准,阳性感染人数差距可以达到40-90%。比如,把CT值小于40作为阳性判断标准,有100人阳性的话;
CT值小于35作标准的时候,则可能只有57人是阳性;阳性率减少43% 。
CT值小于30做标准,则只有10-37人阳性,阳性率减少63%甚至到90%。
《纽约时报》2020年8月的一篇文章里,证实了这点:
Officials at the Wadsworth Center, New York’s state lab, have access to C.T. values from tests they have processed, and analyzed their numbers at The Times’s request. In July, the lab identified 872 positive tests, based on a threshold of 40 cycles.
With a cutoff of 35, about 43 percent of those tests would no longer qualify as positive. About 63 percent would no longer be judged positive if the cycles were limited to 30.
In Massachusetts, from 85 to 90 percent of people who tested positive in July with a cycle threshold of 40 would have been deemed negative if the threshold were 30 cycles, Dr. Mina said. “I would say that none of those people should be contact-traced, not one,” he said.
台湾0感染期间,也就是在台湾“全民阴性”期间,从台湾返国的人,在自己国家被诊断为阳性。可这些人确实无症状,无传染性。
在台湾,今年6月曾经报道过,一名从台湾返回日本的女留学生,返回日本后立即被检出COVID-19阳性,台湾当时是认为自己境内没有任何Covid阳性的。这在台湾引起很大的讨论。台湾人非常担心和怀疑,台湾是不是有很多“隐性感染”的。
台湾中央流行疫情指挥中心后来声明,这个女学生的检测数据,应是落在“灰色地带”,其中关键,就是台、日对PCR检测数据的判读不同。也就是说,这个女学生,按台湾当时的标准应该是被诊断阴性;按日本标准则要被诊断为阳性。
该女学生在日本测出的PCR的Ct值为37.38。在日本,38以下都是被诊断为阳性的。在台湾,35以下才会被确诊为阳性。台湾认为,CT值35以下被诊断为阳性,而一般在32以上病毒应已不具感染力。日方后来也表示,女学生在采检时确实可能已不具传染能力。
这个例子非常清楚地说明,新冠病毒PCR检测,对CT值的判读标准不同,阳性与否的诊断就完全不同。
台湾后来还有几个这样的例子,也就是在台湾清零,未检测出感染时,回到自己国家或地区隔离期间,被当地诊断为阳性。这些案例基本都没被报道有症状和传染性。
那么,一个人自己没有任何症状,身体没有任何变化;也没有任何传染其它人的能力,是真正“有意义的阳性”吗?不是。就比如,人人口腔都带细菌,它不带给你症状也就是不损害你器官,也不传染别人,你会认为这是有意义的阳性,是“病”吗?
这时,哪个标准是“有临床意义”的,“科学”的,“经济”的,“利民”的?哪个会造成损失和恐慌?哪个会无必要的占用更多医疗资源?上面例子里,毫无疑问,台湾的标准,也就是“35以下,被诊断为阳性”更符合真实,更有实际意义。
这时,应该是日本和其它国家,更多分析自己国家的感染数据,看看自己的PCR检测的CT数值标准是不是过高。 但是,当时,是日本和其它国家按自己的标准,例数太多。这样的一例根本没有引起他们的注意。
相反,在全球的紧张恐慌情绪下,特别是有“武汉的前车之鉴”下,特别是在台湾0感染期,倒是引起台湾人的自我反省,自己的标准是不是太低了?
台湾,后来把自己的检测标准调整为,检测结果落在35-40之间,算“可疑阳性,需要重新检测“。好在没有矫枉过正,直接按其它国家标准,简单粗暴地改为37。他们这时要求,检测三个基因数量。若发现三者数值都高,就算CT值在37、38,也会判阳性。若只有其一基因数量高,配合血清学检查,检查抗体分布,若有抗体,也会判断为阳性。
事实上,现在反过来看日本报道的阳性感染数据,再看他们实际的死亡人数,就知道,他们的诊断标准和瑞士,美国一样,CT值是偏高的。
而实际上,即使台湾的标准,也有很多证据证明,35这个数值,依然“高”。可能应该在30-32以下诊断为阳性才是正确的。而每降低一个数字,被统计出来的“阳性”感染人数,都会有非常大区别。
到底,什么是PCR检测?PCR的CT值是什么含义?什么原理?为什么各国和各个实验室的标准都不同?到底多少才应该是诊断标准?什么是真正有意义的阳性?
新冠病毒核酸检测常识 1 --什么是核酸RT-PCR检测?核酸PCR检测新冠病毒的原理?
目前国际标准确诊新型冠状病毒的主要检测方式之一就是针对病毒核酸进行实时荧光定量PCR检测,也就是RT-PCR检测。
Covid-19病毒是一种RNA病毒,即遗传物质是RNA(核糖核酸)。病毒由RNA和蛋白构成,最外一层由脂质和糖蛋白组成包膜外衣,里面蛋白衣壳将RNA包裹在其中,从而使容易降解RNA得到保护。病毒核酸检测的原理就是通过细胞裂解液,让病毒的RNA裸露出来,然后用实时荧光RT-PCR进行检测。
什么是PCR?
- PCR是 polymerase chain reaction,聚合酶连锁反应。是实验室诊断的一个划时代革命。1983年美国化学家凯利.穆利斯(Kary B. Mullis)和女友从旧金山驾车前往乡下度周末,fo蜿蜒盘旋的公路给他了扩增DNA片段的灵感。他以参与DNA复制的「聚合酶」来复制实验样本的DNA,这个方法只要少量的DNA,就可以无限量复制。1993年,穆利斯因而获得诺贝尔化学奖。
简单来说,自然状态下提取的DNA样本浓度一般都比较低,PCR就是用人工技术不断复制DNA,让它一变二,二变四,越变越多。通常DNA要通过PCR扩增后,才能用于检测、测序、转基因等操作。
什么是RT-PCR?
RT-PCR就是逆转录或称反转录PCR(reverse transcription PCR),是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形,基本概念就是一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。
新型冠状病毒是一种RNA病毒,病毒中特异性RNA序列是区分该病毒与其它病原体的标志物。
在新冠病毒检测里使用RT-PCR检测,“即将新型冠状病毒的RNA反转录成互补DNA后,作为反应的模板,再进行DNA扩增反应,并以萤光剂侦测每次PCR循环后产物总量,借以判断是否含有病毒基因。
RT-PCR还有个概念,就是**“Real-Time PCR”,定量PCR或qPCR,(Quantitative Real-time PCR)是实时定量PCR,也就是“实时反转录聚合酶连锁反应”。**
所以,概括说来,核酸RT-PCR检测,也就是实时荧光定量PCR的三个要点:
- 通过PCR来测定样品中的核酸数量
- 通过荧光来检测PCR
- 双倍放大模板可以是DNA或者RNA”
荧光定量PCR最重要的结果呈现形式是Ct值。
新冠病毒核酸检测常识 2 -- 什么是RT-PCR的Ct值?
在PCR反应体系中,包含一对特异性引物(发荧光的和遮蔽荧光的)以及一个探针。该探针是一段特异性的寡核苷酸(Oligonucleotide)序列,两端分别标记了发荧光的有机物(Reporter)和遮蔽荧光的有机物(Quencher)。换句话说,Reporter与Quencher之间由一段能与新冠病毒cDNA配对的探针连接。当Reporter与Quencher距离很近,Reporter的就会被Quencher遮住。当反应体系中存在靶标序列的时候,发荧光的有机物与遮蔽荧光的有机物之间的探针就会被切开,Reporter和Quencher分离,进而发出荧光,反之则不发荧光。
新冠病毒PCR检测原理最关键的是利用引物和探针来实现核酸序列的“靶向匹配”,即寻找新冠病毒约3万个碱基中区别于其他病毒的核酸序列(与其他病毒核酸相似度“低”的区域),设计引物和探针。因为引物和探针与新冠病毒核酸特定区域高度匹配,即特异性很强,一但待检标本PCR扩增结果为阳性,则证明该标本中存在新冠病毒。
这段介绍,可以看看这篇里的示意图:
荧光量将伴随PCR反应中靶标序列的扩增而逐渐增强,当荧光亮度(Fluorescence)达到设定的阈值(Threshold)时,所需要的循环数--Ct值(cycle threshold),会被记录下来。
理想情况下,扩增循环数和产物量之间的关系是:**扩增产物量=起始模板量×(1+En)循环个数。**然而PCR反应并不是一直处于理想情况下,当扩增产物量达到“一定产物量”时,此时循环个数为Ct值,处于指数扩增时期。在PCR的后期,扩增曲线不再呈现指数扩增,进入线性期和平台期。这个扩增曲线如图,是S形的。
Ct值就是PCR扩增过程中,起始模板扩增达到一定产物量时,所对应的扩增循环数。也就是扩增产物的荧光信号达到设定的荧光阈值时的所对应的循环数(Cycle Threshold)。是扩增曲线和阈值线的交叉点。它被用于计算病毒基因表达量差异或者基因拷贝数。
上面的介绍,可能有一些专业性。不太理解也没关系。 简单地说,就是新冠肺炎病毒基因非常微小,所以需要用人工技术,也就是PCR的方式,放大基因,然后用荧光染剂检测扩增后的产物量。每放大两倍就是一个Ct值,如Ct值是30,代表病毒基因在历经30轮放大也就是放大2的30次方倍后,才能被观测到。
当然是,值越小,代表病毒基因浓度高,需要放大的倍数比较小就能观测到荧光。
也就是说,> Ct值和样本中病毒核酸的含量呈现负相关,Ct值越小,代表起始模板量浓度越高,病毒含量越高。Ct值愈高,代表起始模板量浓度越低,病毒RNA浓度愈低、患者体内病毒愈少。
新冠核酸PCR的Ct值结果究竟应该是多少被诊断为阳性?当前的37-40太高,可能应该为30或以下
PCR测试的结果在很大程度上取决于扩增循环的次数,也就是“循环阈值”或Ct值。这个CT值,被当作病毒“阳性”定量的参考值。但它本身不是病毒绝对数量值。Ct是循环阈值,是所需的扩增循环数。
目前,全球实际上,没有统一的值。因为,它本来在不同条件下,就不能完全直接比较(德国RKI)。
目前大多数国家的多数厂家测试将Ct值设置为37到40之间。这意味着如果测试过程需要多达37到40个扩增循环(即37)才能检测到该病毒。
德国RKI 认为,CT值超过30时,不代表是“阴性”,“但病毒量少,以至于无繁殖能力”
RKI,Robert Koch Institut 是德国国家级疾病控制和预防机构。也是全球新冠疫情防治有相当权威发言权的机构。
它在2020年9月24日 《Hinweise zur Testung von Patienten auf Infektion mit dem neuartigen Coronavirus SARS-CoV-2 R关于测试患者是否感染新型冠状病毒SARS-CoV-2的说明》里说,
“Der aus der real-time PCR bekannte Ct-Wert stellt nur einen semi-quantitativen und von Labor zu Labor nicht unmittelbar vergleichbaren Messwert dar, solange es keinen Bezug auf eine Referenz gibt.”
“实时PCR的Ct值只是一个半定量的测量值,没有参考就不能直接在实验室之间进行比较。”
换句话说:PCR测试确实能提供病毒阳性证据,但是由于缺乏标准,从根本上讲不是完全可靠的。结果取决于其他因素和采样。
RKI在2020年7月17日的《 Entlassungskriterien aus der Isolierung, 解除隔离的条件》(https://www.rki.de/DE/Content/InfAZ/N/Neuartiges_Coronavirus/Vorl_Testung_nCoV.html) 里,则说:
“Ein PCR-Ergebnis mit einem Ct-Wert >30 ,stellt kein negatives PCR-Ergebnis dar, sondern einen positiven RNA-Nachweis mit einer dem hohen Ct-Wert entsprechend geringen Viruslast, die nach bisherigen Erfahrungen mit einem Verlust der Anzüchtbarkeit einhergeht.”
“Ct值大于30的PCR结果并不代表PCR阴性,而是对应高CT值的RNA阳性,但病毒载量低,根据迄今为止的经验,这与病毒繁殖能力丧失有关。”
换句话说:如果CT值是在超过30时而得到PCR结果阳性,则病毒载量非常小,以至于病毒无法繁殖甚至好像不存在该病毒。这是因为PCR检测不能检测到病毒,而只能检测到比病毒本身更长的病毒RNA片段,但是,这种结果还是“诊断”上被认为是“阳性”,检测对象被认为是“感染”。
从上面的信息其实可以得出结论,CT最多30个循环数的PCR测试是实际意义的阳性。
美国哈弗大学流行病学家认为,CT值设置为37-40时,不仅能检测到活病毒,还能检测到病毒碎片
“在马萨诸塞州,纽约州和内华达州的官方汇编的三组包括Ct值的测试数据中,多达90%呈阳性的人几乎没有携带任何病毒。...... 哈佛大学流行病学家迈克尔·米纳(Michael Mina)博士说:实际上,如此高的阈值不仅可以检测到活病毒,而且还可以检测到病毒碎片,也就是病毒留下的残留物,这些残留物没有特别的传染风险。类似于在一个人离开后不久在房间里发现头发。
加利福尼亚大学河滨分校的病毒学家朱丽叶·莫里森(Juliet Morrison)也同意,任何CT值高于35的测试都过于敏感。她认为,合理的临界值为30到35。米纳博士说,他会将这个数字设定为30,甚至更低(20-25)。这些变化意味着患者样品中遗传物质的数量必须是当前标准的100倍至1,000倍,才能使测试返回阳性结果。“
什么意思呢?一个人已经康复并且体内仍有少量病毒碎片:通过将Ct设置为30,将不会检测到病毒碎片。通过将Ct设置为40,可以检测到病毒碎片。
CT值设置为37-40时,其它冠状病毒PCR测试也可能阳性
这部分,今天太晚,不扩展写了。分析瑞士和欧洲第二波疫情时写。
2020-10-31 欧洲包括瑞士的所谓“第二波疫情“真的存在吗?答案应该是:“否”
中国核酸PCR检查CT值阳性判断国家指导标准也是37-40
关于瑞士和欧洲所谓第二波疫情,下篇文章继续详细谈。这篇是在分析瑞士当前状况时,看到美国总统大选,有些替川普可惜,而插入的一篇。正好其中内容,也是和准备分析的瑞士和欧洲疫情密切相关。这里顺便把中国的CT标准也放这里。以后写瑞士和中国对比和中国现在的状况时,还可以看看。中国其实,现在武汉和其它地方普查也好,新疆青岛零星发现也好,大家会发现,几乎多数都是“无症状感染者”。里面的含义呢?是不是也和CT值设置过高有关?
中国新型冠状病毒肺炎防控方案(第七版)
附件 6 新型冠状病毒肺炎实验室检测技术指南 第二 新型冠状病毒的实验室检测里第(一)实时荧光RT-PCR方法检测新型冠状病毒核酸。结果判断标准如下:
阴性:无Ct值或Ct为40。
阳性:Ct值<37,可报告为阳性。
灰区:Ct值在37-40之间,建议重复实验,若重做结果Ct 值<40,扩增曲线有明显起峰,该样本判断为阳性,否则为阴 性。注:如使用商品化试剂盒,则以厂家提供的说明书为准。
中国某厂新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸检测试剂盒(PCR荧光探针法)说明书里的阳性判断标准
阳性:两个通道Ct值<35
阴性:一个通道Ct值>35,另一个通道Ct值>40或无Ct 值;
可疑:有一个通道结果Ct值<35,另一个通道检测结 果35≤Ct值≤40,或两个通道检测结果均为35≤Ct值≤ 40,此时对样本进行重复检测,如实验结果仍然在 35-40之间,曲线呈典型S型且有明显指数增长期,则 判断为阳性,否则为阴性。
参考文献:
- 真的假的?COVID-19陽性與否,PCR的篩檢其實存在「灰色地帶」?(https://www.twreporter.org/a/mini-reporter-covid-19-pcr-test),作者:柯皓翔
- Your Coronavirus Test Is Positive. Maybe It Shouldn’t Be 您的新冠病毒测试阳性。但可能不应该是这样,(https://www.nytimes.com/2020/08/29/health/coronavirus-testing.html),作者:Apoorva Mandavilli
- RKI: Hinweise zur Testung von Patienten auf Infektion mit dem neuartigen Coronavirus SARS-CoV-2 RKI:关于测试患者是否感染新型冠状病毒SARS-CoV-2的说明,(https://www.rki.de/DE/Content/InfAZ/N/Neuartiges_Coronavirus/Vorl_Testung_nCoV.html) 24. September 2020
- RKI: Entlassungskriterien aus der Isolierung, 解除隔离的条件(https://www.rki.de/DE/Content/InfAZ/N/Neuartiges_Coronavirus/Vorl_Testung_nCoV.html) 17. Juli 2020
- 指揮中心陽性標準太低 恐成漏網,(https://www.chinatimes.com/newspapers/20200804000512-260114?chdtv),作者:陳人齊
- 理性阐述qPCR实验的Ct值的合理范围(http://www.bioon.com.cn/news/showarticle.asp?newsid=71720),作者:上海翊圣生物科技有限公司
- 相对定量法分析qRT-PCR数据,(https://zhuanlan.zhihu.com/p/32746600),作者:Celia
- 定量PCRi:技术原理,(http://www.z2cc.com/uploads/userup/dlpxzl.pdf),作者,陈云地
- 瑞士Baden免疫学,心脏学教授,Thomas Binderhttps 对PCR 的Ct值的看法:https://www.youtube.com/watch?v=-syjnHYST-4&feature=emb_rel_pause
- 漫談免疫學-62(RT-PCR的Ct值),https://wleemc.pixnet.net/blog/post/120615180-漫談免疫學-62(rt-pcr的ct值),
补充修改
要改成老人家和一般人能看得懂的
病毒太小 ,一般方式测不出来。
用一种方式把它扩大后, 到最后在荧光上能看到。
它循环扩大。
刚开始扩大时 ,荧光量很小,和荧光背景没区别 还是看不出来。就再扩大一次。
到一定次数时 就可以看到了。
CT值 就是这个扩展的次数。病毒基因在特定条件下,需要扩展多少次才能看到荧光。
不是直接原始病毒基因的量 (在这个新冠病毒里,原始基因是RNA,还要转录成DNA模版去做这个荧光反应),也不是扩大后的扩展的产物的量。
但它和这些有关系。就是 1. 起始模版的量(也就是和原始病毒基因密切相关的)2. 扩增后能被看到的量。3 除此以外,还有个扩增效率。
就因为它和起始模版下载量 也就是代表病毒基因的浓度的关系,它可以用来作为核酸测试一下结果。当然是病毒基因浓度越高 到达可看到荧光阈值时需要扩增的次数越少。
理想情况下 关系这样的;
扩增产物量=起始模板量×(1+En)循环个数。